Udvikling af molekylærbiologiske teknikker eksempelvis Polymerase Chain Reaction (PCR) til påvisning af virus.
Sensitiviteten og specificiteten af PCR kan forøges ved Nested-PCR, der er en to-trins PCR reaktion. Vanskeligheder med PCR skyldes hovedsagelig kemiske komponenter i prøvematerialet, der kan inhibere enzymreaktioner og dermed forringe sensitiviteten.
Forøget sensitivitet og specificitet af RT-PCR er mulig ved anvendelse af Nested-PCR teknik, hvor der udføres to PCR reaktioner med forskellige primer sæt.
I den første PCR reaktion anvendes et primer sæt til amplifikation af det ønskede nukleinsyre segment, mens den sekundære reaktion udføres på PCR produktet fra den første reaktion.
I den sekundære reaktion kan der enten benyttes en primer fra første reaktion og en ny internal primer, og metoden kaldes seminested PCR, eller der kan benyttes to nye interne primere, og denne metode betegnes Nested-PCR. Metoden har desuden den fordel, at inhiberende substanser fortyndes i den sekundære PCR.
